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Micron Document

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<title>Neutralisationstest</title>

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<h1 id="firstHeading" class="firstHeading mw-first-heading"><span class="mw-page-title-main">Neutralisationstest</span></h1>

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<div id="mw-content-text" class="mw-body-content mw-content-ltr" lang="de" dir="ltr"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="de" dir="ltr"><p>Der <b>Neutralisationstest</b> (NT) ist eine Variante des <a href="Plaque-Assay" title="Plaque-Assay">Plaque-Assays</a>, mit dem <a href="Neutralisierende_Antik%C3%B6rper" class="mw-redirect" title="Neutralisierende Antikörper">neutralisierende Antikörper</a> gegen bestimmte <a href="Viren" title="Viren">Viren</a> im <a href="Blutserum" title="Blutserum">Serum</a> eines <a href="Patient" title="Patient">Patienten</a> oder eines <a href="Impfling" class="mw-redirect" title="Impfling">Impflings</a> nachgewiesen werden können.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Prinzip">Prinzip</h2></div>

<p>Durch Bindung von <a href="Antik%C3%B6rper" title="Antikörper">Antikörpern</a> an die Oberfläche des Virus wird dessen Aufnahme in die <a href="Zelle_(Biologie)" title="Zelle (Biologie)">Zelle</a> verhindert, so dass es zu keiner Vermehrung mehr kommen kann und die Anzahl an <a href="Plaque-Assay#Prinzip" title="Plaque-Assay">Plaques</a> in einer <a href="Zellkultur" title="Zellkultur">Zellkultur</a> reduziert wird. Daher bezeichnet man den Neutralisationstest auch als <b>Plaque-Reduktions-<a href="Assay" title="Assay">Assay</a></b>.

</p><p>Neutralisierende Antikörper sind Antikörper, welche die Aufnahme eines Virus in eine Zelle blockieren können. Konzentrationsabhängig werden durch die neutralisierenden Antikörper alle Stellen blockiert, die an Zellen binden. Im Neutralisationstest werden nur neutralisierende Antikörper erfasst. Neutralisierende Antikörper, die gegen mehrere Virusstämme wirken, werden als <a href="Neutralisierender_Antik%C3%B6rper#Breitneutralisierende_Antikörper" title="Neutralisierender Antikörper">breitneutralisierende Antikörper</a> bezeichnet, z. B. <a href="Breitneutralisierende_Anti-HIV-Antik%C3%B6rper" title="Breitneutralisierende Anti-HIV-Antikörper">breitneutralisierende Anti-HIV-Antikörper</a> oder <a href="Breitneutralisierende_Anti-IAV-Antik%C3%B6rper" title="Breitneutralisierende Anti-IAV-Antikörper">breitneutralisierende Anti-IAV-Antikörper</a>, und können ebenso im Neutralisationstest gemessen werden.

</p><p>Der Neutralisationstest kann auch zur <a href="Quantifizierung" title="Quantifizierung">Konzentrationsbestimmung</a> von <a href="Zellgift" title="Zellgift">Zellgiften</a> (darunter verschiedene <a href="Toxin" title="Toxin">Toxine</a> unterschiedlichen Ursprungs) verwendet werden, gegen die funktionshemmende Antikörper gebildet werden.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Ablauf">Ablauf</h2></div>

<p>Eine bekannte Menge an <a href="Virion" title="Virion">Virionen</a> wird zu einer Zellkultur gegeben. Es kommt auf Grund des <a href="Cytopathischer_Effekt" title="Cytopathischer Effekt">zytopathischen Effekts</a> des Virus zu einer Zellzerstörung. In weiteren Ansätzen werden Viren und Patientenserum oder <a href="Verd%C3%BCnnung" title="Verdünnung">Verdünnungen</a> davon zur Zellkultur gegeben. Sind im Serum ausreichend neutralisierende Antikörper gegen dieses Virus vorhanden, so wird der zytopathische Effekt vermindert und die Zellen der Kultur bleiben intakt. Wie beim Plaque-Assay werden die abgelösten Stellen des Zellrasens in Zellkultur gezählt. Zur Bestimmung des <a href="Titer_(Medizin)#Medizin" title="Titer (Medizin)">Antikörpertiters</a> wird das Patientenserum in unterschiedlichen Kulturen mehr und mehr verdünnt (1:2, 1:4, 1:8 usw.). Als Titer wird die letzte Verdünnung bezeichnet, bei der mehr als 50 % des Zellrasens erhalten bleibt.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Stellenwert_in_der_medizinischen_Routine">Stellenwert in der medizinischen Routine</h2></div>

<p>Der Neutralisationstest ist ein sehr aufwändiges und langwieriges Verfahren, da Geräte für eine Zellkultur benötigt werden und der Test üblicherweise mehrere Tage dauert. Weiterhin bestehen bei <a href="Pathogen" class="mw-redirect" title="Pathogen">pathogenen</a> Viren erhöhte Anforderungen an die <a href="Biologische_Schutzstufe" title="Biologische Schutzstufe">Sicherheitsstufe des Labors</a>, da mit nativem Virus gearbeitet wird. Ebenso erfordern Zellkulturen ein weitaus größeres Maß an Arbeitsaufwand und Erfahrung als die Nutzung vorgefertigter Test-Kits.

</p><p>Die <a href="Spezifit%C3%A4t" class="mw-redirect" title="Spezifität">Spezifität</a> der Neutralisationsreaktion wird jedoch von keinem automatisierten <a href="Immunassay" title="Immunassay">Immunassay</a> erreicht, weshalb der NT vielfach als Referenztest für die <a href="Qualit%C3%A4tskontrolle" class="mw-redirect" title="Qualitätskontrolle">Qualitätskontrolle</a> verwendet wird. Bei der Suche nach neutralisierenden Antikörpern ist der Neutralisationstest alternativlos.

</p>

<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Literatur">Literatur</h2></div>

<ul><li>H. Hof, R. Dörries: <i>Medizinische Mikrobiologie</i>, 3. Auflage Stuttgart 2005, ISBN 3-13-125313-4, S. 42f.</li></ul></div><div><div class="zim-footer">

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